Aceste camere, comandate de Papa Iulius al II-lea iubitoare de arta si dupa el de catre Papa Leo X, sunt acoperite de o serie magnifica de fresce de catre Rafael. In re-descoperirea traditiilor picturii istorice, Raphael a inceput o traditie de arta care urma sa fie urmata de secole. In fiecare dintre scene, el foloseste o compozitie simetrica clasica, pozitionand personajele in perspectiva in jurul unui punct focal central. Stanza della Segnatura si Stanza di Eliodoro au fost pictate de Raphael insusi; Stanza dell'Incendio di Borgo a fost facuta de studentii sai sub supravegherea sa, iar plafonul de Perugino; Stanza di Constantino a fost pictata dupa moartea lui Raphael de catre Giulio Romano si Gianfrancesco Penni. Frescele din a doua camera, Sala della Segnatura, au fost pictate de Raphael intre 1508 si 1511 si impreuna cu Capela Sixtina, reprezinta realizarea suprema a picturii renascentiste. Picturile transmit cultura perioadei in toata splendoarea ei si prezinta teme umaniste - stiintele naturii realizabile fara revelatie divina, filosofie, istorie, matematica, drept civil si dreptate.