Chiar daca a fost jefuit de multe dintre comorile sale de Napoleon, Pinacoteca contine 16 camere de arta nepretuita din Evul Mediu pana la opere contemporane. Aranjate in ordine cronologica, fotografiile ofera un sondaj excelent al dezvoltarii picturii occidentale. Arta medievala include picturi bizantine, sienese, umbre si toscane, precum si un triptych Giotto si madona si Sfantul Nicolae din Bari de Fra Angelico. Exista un triptic de Filippo Lippi, Coronarea Fecioarei de Pinturicchio si a madona de Perugino. O camera este dedicata tapiserii din desene animate de Raphael; a lui Madonna din Foligno; si ultimul sau tablou, faimosul 1517 Schimbarea la Fata. Portretele includ neterminata lui da Vinci Sfantul Ieronim, o Madonna Titiana si Caravaggio ingropare.